Coronavirus aramada (SARS-CoV-2) Ohun elo PCR gidi-akoko pupọ
Irọra giga yii, ohun elo PCR ti o ṣetan lati lo wa ni ọna kika lyophilized (ilana gbigbe didi) fun ibi ipamọ igba pipẹ.Ohun elo naa le gbe ati tọju ni iwọn otutu yara ati pe o jẹ iduroṣinṣin fun ọdun kan.tube ti premix kọọkan ni gbogbo awọn reagents nilo fun imudara PCR, pẹlu Reverse-transcriptase, Taq polymerase, awọn alakoko, awọn iwadii, ati awọn sobusitireti dNTPs.O nilo nikan ṣafikun omi distilled 13ul ati awoṣe RNA ti a fa jade 5ul, lẹhinna o le ṣiṣẹ ati imudara lori awọn ohun elo PCR.
Ẹrọ qPCR yẹ ki o pade awọn ibeere wọnyi:
1. Fit 8 rinhoho PCR tube iwọn didun 0,2 milimita
2. Ni Diẹ sii ju awọn ikanni wiwa mẹrin lọ:
| ikanni | Igbadun (nm) | Ijadejade (nm) | Awọn awọ ti a ti sọ tẹlẹ |
| 1. | 470 | 525 | FAM, SYBR Green I |
| 2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
| 3. | 571 | 621 | ROX, TEXAS-pupa |
| 4 | 630 | 670 | CY5 |
PCR-awọn iru ẹrọ:
7500Eto PCR gidi-gidi, Biorad CF96, iCycler iQ™ Eto Wiwa PCR akoko-gidi, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
Iṣoro ti gbigbe pq tutu ti aramada Coronavirus nucleic acid reagent iwari
Nigbati awọn atunmọ wiwa nucleic acid ti aṣa ni gbigbe ni ijinna pipẹ, ibi ipamọ pq tutu (-20 ± 5) ℃ ati gbigbe ni a nilo lati rii daju pe bioactive ti henensiamu ninu awọn reagents wa lọwọ.Lati rii daju pe iwọn otutu ti de iwọn boṣewa, ọpọlọpọ awọn kilo kilo ti yinyin gbigbẹ ni a nilo fun apoti kọọkan ti reagent idanwo nucleic acid paapaa kere ju 50g, ṣugbọn o le ṣiṣe ni fun ọjọ meji tabi mẹta nikan.Lori irisi ti iṣe ile-iṣẹ, iwuwo gangan ti awọn reagents ti o funni nipasẹ awọn aṣelọpọ ko kere ju 10% (tabi o kere ju iye yii) ti eiyan naa.Pupọ julọ iwuwo wa lati yinyin gbigbẹ, awọn akopọ yinyin ati awọn apoti foomu, nitorinaa idiyele gbigbe jẹ giga gaan.
Ni Oṣu Kẹta ọdun 2020, COVID-19 bẹrẹ lati ya jade ni iwọn nla kan ni ilu okeere, ati pe ibeere fun aratuntun wiwa nucleic acid ti aramada ti pọ si lọpọlọpọ.Laibikita idiyele giga ti tajasita awọn reagents ni pq tutu, ọpọlọpọ awọn aṣelọpọ le tun gba nitori opoiye nla ati èrè giga.
Bibẹẹkọ, pẹlu ilọsiwaju ti awọn eto imulo okeere ti orilẹ-ede fun awọn ọja egboogi-ajakaye, bakanna bi iṣagbega iṣakoso orilẹ-ede lori ṣiṣan ti eniyan ati eekaderi, itẹsiwaju ati aidaniloju wa ni akoko gbigbe ti awọn reagents, eyiti o yorisi awọn iṣoro ọja olokiki ti o ṣẹlẹ. nipasẹ gbigbe.Akoko gbigbe ti o gbooro (akoko gbigbe ti bii idaji oṣu kan jẹ eyiti o wọpọ) yori si awọn ikuna ọja loorekoore nigbati ọja ba de ọdọ alabara.Eyi ti ni wahala pupọ julọ awọn reagents acid nucleic awọn ile-iṣẹ okeere.
Imọ-ẹrọ Lyophilized fun reagenti PCR ṣe iranlọwọ fun gbigbe ti aramada Coronavirus wiwa nucleic acid reagent agbaye
Awọn reagents PCR lyophilized le ṣee gbe ati tọju ni iwọn otutu yara, eyiti ko le dinku idiyele gbigbe nikan, ṣugbọn tun yago fun awọn iṣoro didara ti o ṣẹlẹ nipasẹ ilana gbigbe.Nitorinaa, lyophilizing reagent jẹ ọna ti o dara julọ lati yanju iṣoro ti gbigbe ọja okeere.
Lyophilization pẹlu didi ojutu kan sinu ipo ti o lagbara, ati lẹhinna sublimate ati ya awọn oru omi lọtọ labẹ ipo igbale.Solute ti o gbẹ wa ninu apo eiyan pẹlu akopọ kanna ati iṣẹ ṣiṣe.Ti a ṣe afiwe pẹlu awọn reagenti olomi ti aṣa, apakan-kikun lyophilized Novel Coronavirus nucleic acid reagent ti iṣelọpọ nipasẹ Liming Bio ni awọn abuda wọnyi:
Iduroṣinṣin ooru ti o lagbara pupọ:o le pẹlu itọju imurasilẹ ni 56℃ fun awọn ọjọ 60, ati pe mofoloji ati iṣẹ ti reagent ko yipada.
Ibi ipamọ iwọn otutu deede ati gbigbe:ko si iwulo fun pq tutu, ko si iwulo lati tọju ni iwọn otutu kekere ṣaaju ṣiṣi silẹ, tu aaye ipamọ tutu ni kikun.
Ṣetan-lati-lo:lyophilizing ti gbogbo awọn paati, ko si iwulo fun atunto eto, yago fun isonu ti awọn paati pẹlu iki giga bi henensiamu.
Awọn ibi-afẹde pupọ ni tube kan:ibi-afẹde wiwa ni wiwa aramada coronavirus ORF1ab gene, N gene, S gene lati yago fun jiini ọlọjẹ.Lati dinku odi eke, a lo Jiini RNase P eniyan bi iṣakoso inu, lati le pade iwulo ile-iwosan fun iṣakoso didara ayẹwo.
